尊龙凯时人生就博推出的婴儿利什曼虫探针法荧光定量PCR试剂盒（CAT#: 15-18620）专为检测婴儿利什曼虫而设计。此试剂盒具有高灵敏度和快速反应的特点，适用于科研用途，需在-20℃低温保存，保质期为一年。

产品特点

本试剂盒可有效检测婴儿利什曼虫（Leishmania infantum），该虫种可导致动物源性内脏利什曼病（黑热病）。虽然婴儿利什曼虫感染后可能无明显症状，但无症状感染的犬类已被证实在疾病传播中具有重要作用。试剂盒的主要优势包括：

• 即开即用，用户仅需提供DNA模板。
• 附带阳性对照，便于区分假阴性样品。
• 反应快速，灵敏度高。
• 可进行50次20μL体系的探针法荧光定量PCR。

规格及成分

本试剂盒包含以下成分：

• 2×Probe qPCR Mix - 600μL
• DEPC-H₂O - 1 mL
• 婴儿利什曼虫qPCR引物-探针混合液 - 90μL
• 阳性对照 (1×10⁸拷贝/μL) - 50μL
• 使用手册 - 1份

运输与保存

该试剂盒需在低温下运输，并保持在-20℃保存。阳性对照需单独存放，避免污染其他试剂。使用时需自备样品DNA和超纯水。

使用方法

一、DNA提取

请使用选择的DNA提取方法，确保试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

由于阳性对照浓度较高，该稀释操作须在独立区域进行，以免污染。步骤如下：

1. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
2. 向每个管中加入45μL DEPC-H₂O。
3. 在第7号管中加入5μL阳性对照，震荡1分钟，得到1×10⁷拷贝/μL的标准曲线样品。
4. 依次进行稀释，重复以上操作以获得6个不同稀释度的标准曲线样品。

三、试剂配制

根据待检样品数量，准备相应的qPCR管，向每管中加入以下成分：

四、添加模板

向qPCR管中加入2μL模板，依次顺序为阴性对照、待测样品模板和阳性对照，离心30秒后进行扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放置在PCR扩增仪上进行反应，扩增程序如下：

• 预变性：95℃，3分钟。
• qPCR反应：40个循环（95℃ 15秒，58℃ 20秒，72℃ 20秒，采集FAM通道的荧光信号）。

六、结果分析

根据阳性对照的Ct值评估结果，具体标准为：

• 阳性对照Ct值<30，显示S型曲线。
• 阴性对照Ct值38或无Ct值。
• 样本检测结果：若Ct值<35，结果为阳性；若Ct值38或无Ct值，则为阴性。ct值在35-38则需复检。

关联产品

本公司还提供婴儿利什曼虫染料法荧光定量PCR试剂盒，更多信息请访问尊龙凯时人生就博官方平台。